1982年，进入扶余市民间艺术团做演员，被当地人称为“小郭兰英”，她开始加入专业的剧团进行下乡演出。

1986年，获国家二级演员职称。

1990年，与刘威合作，参演反映七十年代到九十年代二十年来东北农村巨大变迁的电视剧《月牙沟》，高秀敏在剧中饰演柳翠云。

1992年辞职做个体演员，开始出演小品；同年高秀敏和搭档带着何庆魁创作的小品《包袱》到深圳参加全国小品大赛，并获得金奖。

1994年，高秀敏以小品《密码》获得央视春节联欢晚会的入场券，并且获得三等奖。

1995年，与吕毅、唐乃芳合作，在青岛电视台播放的电视剧《金色海湾》中饰演丁母。

1996年，参演电视剧《黑土地黄棉袄》。

1997年，参演电视剧《一乡之长》；同年她以小品《柳暗花明》获得央视春节联欢晚会三等奖，开始和赵本山、范伟尝试合作。

1998年，在电视剧《农家十二月》中饰演胖婶；同年出演央视春节晚会小品《拜年》，并获得了二等奖；后又参演电视剧《晚霞不是梦》。

1999年，和范伟、黑妹合作，出演小品《将心比心》，并获得春晚小品三等奖。

2004年，与韩雨芹、崔林合作，在电视剧《男生女生》中饰演李南母亲。

2001年，高秀敏在电视剧《刘老根》中饰演丁香；同年客串电视剧《东北一家人》，并且与范伟合作，出演小品《卖拐》。

2002年，和赵本山、范伟合作，以小品《卖车》获得央视春晚一等奖；同年在电视剧《刘老根2》中饰演丁香。

2003年，和赵本山、范伟合作，以小品《心病》获得央视春晚一等奖；同年在电视剧《风筝奇缘》中饰演大夫人。

2004年，和赵本山、范伟合作，以小品《送水工》获得央视春晚一等奖；同年在电视剧《水兵俱乐部》中饰演陶母；后又与韩雨芹、崔林合作，在电视剧《男生女生》中饰演李南母亲，同年参演豫剧《我爱我孙 》。

2005年，开始更多尝试，并重拾起二人转，同年由高秀敏主演，何庆魁、高秀敏夫妇共同担任制片人的电视剧《圣水湖畔》于中央电视台综合频道（CCTV-1）播出；同年在电视剧《半路夫妻》中饰演管母；后又在管虎导演的电视剧《生存之民工》中饰演录像厅老板；之后与胡可合作，在电视剧《县令黄马褂》中饰演孟夫人；并且还参演小品《守岁大观园》。